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hplc溶剂选择中的关键考虑因素

发布时间:2021-07-03      点击次数:196

        选择用作HPLC分析流动相的溶剂是色谱分析过程的关键步骤。到现在为止,没有一种能够满足所有分析需求的通用溶剂,而且根据分析要求所使用的溶剂组合会变得更多。选择合适的溶剂是根据其物理性质以及与样品、色谱柱固定相的相容性。

        流动相溶剂选择的一般要求是:溶剂应当是高纯度,溶剂与固定相不互溶,并能保持色谱柱的稳定性,建议使用纯水或者液相色谱专用的溶剂;溶剂的性能与使用的检测器应当匹配;溶剂对样品应有足够的溶解能力,样品要完全溶于流动相。如果有不溶的样品将导致流动相分离或悬浮,会导致后续一系列的操作问题;溶剂应具有低的粘度和适当低的沸点;尽量避免使用具有显著毒性的溶剂。

        除此之外本文还讨论了选择合适的流动相溶剂的一些其他重要的考虑因素。

        成本

        成本是一个重要的考虑因素,因为HPLC需要高纯度等级的溶剂,特别在大型实验室中经常看到数十个HPLC系统全天候运行。这意味着每天会大量消耗高纯度的溶剂,因此成本方面的考虑至关重要。想要既符合实验要求又价格比较实惠的溶剂,很多时候都不能同时满足。如果这个时候溶剂还没有充分使用,造成浪费,就更得不偿失了。

        恒谱生2μ,5μ,10μ,20μm入口溶剂过滤器吸滤头,不会将空气引入系统,无气泡进入流动相管路,储液瓶溶剂抽取利用率可达99%以上,大大减少瓶底溶剂因无法净真空吸取而造成的浪费。

        吸光度

        通常,HPLC中使用的检测器基于样品成分对光的吸收。在选定的波长范围内,流动相成分的固有吸光度不能干扰样品的吸光度。理想情况下,流动相溶剂在目标波长范围下没有吸收光线是好的。

        挥发性

        流动相溶剂应具有低挥发性。高挥发性溶剂可能导致流动相组成在使用和存储过程中发生变化,这会导致色谱图的重现性很差。

        黏度

        所选的溶剂应具有低粘度让流过色谱柱的流体不会产生高背压。色谱柱背压形成的原因有很多,样品的易吸附机制也可能会和柱前端的硅胶表面游离的硅醇基发生作用导致色谱柱背压升高。如果有颗粒物堵塞柱头也会导致色谱柱背压升高。为了防止色谱柱背压升高,我们可以选择在液相系统中加入在线过滤器,在线溶剂过滤器安装在液相泵和进样器之间,能够去除溶剂中的颗粒物,避免它们进入进样器,从而防止堵塞。HPLC技术对到达检测器的流动相的组成非常敏感,因此必须通过在线过滤器除去溶剂里的固体悬浮液。脱气也是去除任何少量溶解空气的必要条件,否则会导致流量限制或杂散峰。

        恒谱生不锈钢在线过滤器安装在泵的出口和进样阀之间,采用滤杯式结构受液面积大,使用寿命长,既可有效的防止颗粒进入系统,又能保证足够的液流。恒谱生液相超高压在线过滤器色谱耗材配件抗腐蚀性好;清洗或更换简便;不易堵塞,寿命产品;死体积少,不漏液,低背压,有多种规格可供选择。

 

        惰性

        所选溶剂应对样品组分,色谱柱填充物和色谱柱材料呈惰性。如果与这些成分中任何一种有反应性都可能导致形成沉淀物,气体或其他反应产物,从而破坏系统性能。溶剂与样品接触后不应形成单独的相。换句话说,应该与溶剂完全混溶。

        恒谱生科学仪器有限公司是致力于研发制造高质量色谱耗材配附件的高科技生产厂家,我们在无气泡较高净化能力的溶剂进样过滤器、超高压在线过滤器、较少死体积色谱保护柱与卡套、0.1微米高光洁度色谱柱柱管、鬼峰去除柱、管路接头等领域具有十多年丰富的生产经验和较强大的制造技术能力。

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