色谱柱填料技术呈现二大趋势。一个趋势是快速液相,利用亚 2?m小粒径硅胶、核壳型硅胶;第二大趋势是越来越丰富的选择性。填料的粒度主要影响填充柱的两个参数,即柱效和背压。粒度越小,填充柱的柱效越高;小于3μm的填料应用,在相同选择性条件下,提高柱效可提高分离度,但不是位一的因素。
如果固定相选择是真确,但是分离度不够,那么选择更小粒度的填料是很用有的,3μm填料填充柱的柱数比相同条件下的5μm填料的柱效提高近30%。然而,3μm的色相谱的背压却是5μm的2倍。与此同时,柱效提高意味着在相同条件下可以选择更短的色谱柱,以缩短分析时间,另外,可以采用低粘度的溶剂做流动相或增加色谱柱的使用温度,比如用乙腈代替甲醇,以降低色谱柱的压力。
色谱柱填料方法有下面这些:
a、反相(与离子对)方法
C18(十八烷基或ODS)-----------普适性好;保留性强,用途广
C8(辛基)-----------与C18相似,但保留值稍小
C3,C4-----------保留值小;大多用于肽类与蛋白质
C1【三加基硅烷(TMS)】------保留值小;不稳定
苯基,苯乙基-----------保留值适中;选择性有所不同
CN(氰基)-----------保留值适中;正相和反相均可使用
NH2(氨基)-----------保留性弱;用于烃类;欠稳定
聚苯乙烯基b-----------在1<PH<13的流动相中稳定;对某些分离峰形好,柱子寿命长
b、正相方法
CN(氰基)-----------普适性好;极性适中;用途广
OH(二醇基)-----------极性大于CN
NH2(氨基)-----------极性大,欠稳定
硅胶b------------普适性好;价廉;操作欠方便;用于制备LC
c、空间排阻方法
硅胶b-----------普适性很好;作吸附剂用
硅烷化硅胶-----------吸附性弱,溶剂兼容性好;适用于有机溶剂
OH(二醇基)------------欠稳定;在水SEC中使用(凝胶过滤)
聚苯乙烯基b------------广泛用于有机SEC(凝胶渗透);一般与水和极性大的有机溶剂不相容
d、离子交换方法
键合相------------稳定性与重现性均不好
聚苯乙烯基b-------------柱效不高;稳定;重现性好
好了,以上便是关于色谱柱填料的相关内容介绍了。