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使用高效液相色谱 (HPLC) 来分析样品被广泛应用于药物组分分析、食品添加剂测定和环境样品测试等。由于液相色谱柱是许多实验室的核心设备且成本高昂,因此保护柱子免受损坏是延长色谱柱寿命和降低成本的首要考虑因素。维护良好的色谱柱还能产生一致且准确的数据,为可靠的分析结果提供支持。
如何提高分析色谱柱性能?色谱柱性能取决于多种因素,包括样品特性、不溶性颗粒的存在以及使用后的清洁维护等。但是在使用过程中,并不是所有实验条件都是理想条件。例如,某些样品具有苛刻但必要的 pH 条件。因此,对于液相分析柱的预防性维护程序有助于最大限度地延长色谱柱的使用寿命并保持 HPLC 的效率。
哪些因素会影响UPLC色谱柱寿命?常见的 HPLC 问题包括柱背压升高、泄漏以及无法保持一致的流速等。来自未过滤样品或流动相的颗粒会导致这些问题出现,任何进入 HPLC 系统的物质都存在将颗粒物质引入色谱柱基质的风险,从而可能缩短色谱柱的使用寿命。因此,样品一定要进行预处理,流动相需要用溶剂过滤器进行过滤后使用。
对流动相进行过滤和脱气将去除颗粒和溶解气体,确保它们不会到达并损坏色谱柱。如果流动相含有来自溶解固体材料的缓冲盐或改性剂,则过滤尤为重要。在泵的低压进样口侧使用的恒谱生HPLC溶剂进样口过滤器有助于保护止回阀、进样器和色谱柱免受有害颗粒污染物的破坏。将此步骤添加到日常工作中有助于降低色谱图中的基线噪声。
使用在色谱线过滤器和液相保护柱也有助于防止颗粒进入系统和色谱柱。色谱柱是 HPLC 系统中的关键组件,这些色谱柱保护器的使用取决于应用,需要一种或两种。恒谱生色谱保护柱是一种短柱,样品和流动相在进入主柱之前通过它,有助于去除杂质和悬浮固体,防止它们到达分析柱。分析保护柱的使用取决于具体的应用,当色谱行为发生变化时,例如背压、保留时间变化或峰展宽时,需要定期更换保护柱。
实验中也需要考虑样品与流动相的兼容性,因为某些样品成分会与特定的 HPLC 溶剂发生反应。例如,醛和酮与氨基流动相反应。避免反应性组合有助于保护色谱柱免受损坏。
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