选择保护柱的原则是:在满足分析分离要求的前提下,尽可能的选择较短的保护柱结构,对分离样品有比较小的保留性的色谱填料。
在选择保护柱之前首先要考虑的是样品是否清洁。对于大部分分析工作来说,一支1cm长的保护柱便能提供充分的保护作用。但是,如果样品非常不清洁,或工作中要经常更换保护柱,那么就应该选择2cm或3cm长的保护柱。但是,随着保护柱的加长,保留时间也会变长。
一般来说,保护柱填料的选择是由分析柱的填料决定的,正常情况下可以选择与分析柱一样的色谱填料,但是,根据实际工作的需要,也可以不必与分析柱的填料完全匹配。
当满足下列条件之一时就应该更换保护柱:
a、色谱柱的理论塔片数下降15%以上;
b、色谱柱柱前压上升15%以上;
c、最难分离的物质对分辨率下降15%以上;
d、样品进样次数超过150次;
e、流动相通过1500倍的色谱柱体积。