一、色谱柱的堵塞：任何来自流动相或样品的颗粒物质都会污染色谱柱滤网，一些颗粒还可能迁移到柱子填料中，这将导致柱子背压的增加。这给泵带来了更大的压力，并可能导致柱子沉降，产生空隙从而导致峰的分裂。高效液相色谱柱在使用过程中会遇到许多不同的物质，如缓冲液中的盐或流动相和样品中的杂质，这些物质可能比被分离的分析物有更少或更多的保留。这些不希望出现的干扰，如果被检测器观察到，就会表现为鬼峰、斑点、基线颠倒甚至是负峰。吸收的杂质可能对保留机制产生负面影响（缩短保留）或开始作为新的固定相...

1)在pH值正常范围内(2~8)可选用现代高纯硅胶色谱柱，具有峰形好，重现性高和寿命长的特点，选用较短的柱子可以提高分离效率，选用较长的柱子可以增加保留，选用小颗粒度的填料可以提高分离度，对分子量大的组分宜选用大孔径填料的色谱柱。2)分离极性大的组分(流动相水相过大)采用AQ类似的色谱柱。3)分离生物碱类的化合物选用经过烷基化处理封口的填料可防止碱性化合物的拖尾现象。4)极端酸性条件下(pH小于2)选用宽pH值色谱柱。5)选用含碳量高的柱子可以增加保留。

液相色谱对于实验室分析员来说是容易上手的仪器了，但就算是经验丰富的分析员都会经常出现错误的操作导致液相色谱仪器发生故障。而这个时候分析员一般就会选择把色谱柱进行反冲这个方法，但恒谱生在这里建议分析员在一般情况下还是不要反冲色谱柱，除非色谱柱有特别说明是可以反冲的。那么，哪些柱子不能反向冲洗呢？其实有两种，一种是两端柱筛板不一样是不适合的，因为入口的那一端柱筛板的孔径比较大会导致固体颗粒物质的堵塞，所以一旦进行反冲就有可能出现造成填料的流失从而导致分析柱的柱效下降的情况；另一种...

在高效液相分析检测样品的过程中，液相保护柱会受到来自于样品及色谱系统的污染，从而导致色谱柱耐用性差、寿命缩短。来自于色谱系统的污染主要指，HPLC仪器系统中部件磨损而产生的固体颗粒，以及流动相系统过滤不全部残留的固体颗粒。来自于样品的污染主要指，未全部溶解的样品或者已全部溶解的样品进入色谱系统中，由于样品溶剂和流动相溶剂对样品溶解存在的溶解度差异，导致沉淀析出污染系统。特别是对于中药、天然产物、合成中间体及生物药品的检测，因基质的复杂性，色谱柱受污染的情况会更加严重。污染会导...

在正相色谱中，一般采用极性键合固定相，硅胶表面键合的是极性的有机基团，键合相的名称由键合上去的基团而定。常用的有氰基(-CN)、氨基(-NH2)、二醇基(DIOL)键合相。流动相一般用比键合相极性小的非极性或弱极性有机溶剂，如烃类溶剂，或其中加入一定量的极性溶剂(如氯仿、醇、乙腈等)，以调节流动相的洗脱强度。通常用于分离极性化合物。一般认为正相色谱的分离机制属于分配色谱。组分的分配比K值，随其极性的增加而增大，但随流动相中极性调节剂的极性增大(或浓度增大)而降低。同时，极性键...

溶剂混合时气泡的形成会导致液相色谱分析中的许多问题，这些问题可以通过对流动相进行脱气来避免。当溶剂混合时，空气的溶解度低于同比例的纯溶剂，过量的空气会从溶液中析出/冒泡。脱气是用来描述溶解气体从溶液中出来的术语。这种现象也可能发生在HPLC系统中，其中粗糙的表面会产生气泡形成的成核位点。由于产生死体积，气泡还可以改变流动相通过色谱柱的流量。在HPLC分析中，通过对流动相脱气，可以在很大程度上避免因气泡形成而产生的问题。一、HPLC系统中的除气1.低压混合：低压混合系统更容易形...