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液相保护柱在高效液相色谱(HPLC)分析中扮演着重要角色,特别是在处理色素、防腐剂等复杂样品时,其预处理效果直接关系到分析结果的准确性和仪器的使用寿命。以下是对液相保护柱在色素、防腐剂高效预处理方面的详细探讨:一、液相保护柱的作用1.延长色谱柱寿命:保护柱能够阻挡样品中的颗粒和杂...
影响C18色谱柱寿命的几个因素主要包含:流动相因素,样品因素与其他因素。色谱柱使用过程中应该注意这些因素,才能有效增加使用寿命。一、流动相因素1、流动相pH不同基质的填料具有不同的pH适用范围。常温下无定形硅胶在纯水中的溶解度约为100mg/L-1,且在pH1~9的范围内溶解的硅胶量几乎是常量,考虑到溶解速度的影响,对于硅胶基质的填料,其所能承受的流动相pH范围约为1~8。键合相硅胶填料则由于键合层的屏蔽作用,使填料对流动相的适应范围大大增加,如现在广泛使用的反相色谱填料C1...
液相色谱是世界各地实验室使用的流行纯化技术。如果系统设置和操作正确,它可以立即从混合物中分离出所需的化合物。学习如何使用和制备缓冲液和溶剂是能提高系统性能的重要技巧之一。准确制备和正确选择缓冲液对于在液相色谱中获得可重复的结果至关重要。一、了解您的化合物如果您正在寻找混合物中的特定化合物,您应该使用最能将您的分析物与其他分析物分开的缓冲液/溶剂组合。例如,了解极性和溶解度(极性或非极性)、电离、您正在寻找的紫外吸光度将有助于指导您使用特定的色谱柱和溶剂组。二、纯度使用较低等级...
本文的重点是快速液相色谱和高效液相色谱。没有一种完mei的协议适合每一种分离目的。因此,建议为您的特定应用程序优化方法。通过本文中列出的建议以及一些前期阅读和测试,您将轻松纯化您正在寻找的组件。一、快速液相色谱纯化使用快速色谱法进行纯化的缺点是该方法固有的分辨率较低。快速液相色谱柱使用更大的粒径和柱容量,允许使用更多的起始材料,但以分辨率和纯度为代价。如果化合物不需要更高的纯度,或者如果下一步将进行HPLC,这可能是您的选择。1、确定溶剂系统样品的纯度(即混合物中有多少化合物...
质谱(MS)使研究人员能够研究许多特性,例如样品的分子量、结构、特性、数量和纯度。当与液相色谱技术相结合能成为一种强大的分析工具,能够从复杂的生物混合物(如牛奶、血清和全脂)中提取有关一系列化合物的有意义的数据,包括药物代谢物、肽和蛋白质-细胞裂解物。一、液相色谱与质谱在将样品引入MS仪器之前,通常通过过滤掉颗粒物、浓缩分析物、脱盐和通常分离出可能导致背景离子或抑制电离的化合物来制备样品。大多数情况下,许多或所有这些步骤都是由HPLC、UPLC系统完成的。样品制备需要对样品进...
分析保护柱是液相色谱分析中重要的色谱耗材,使用保护柱可大大降低分析柱受污染的程度,延长分析柱使用寿命。保护柱位于进样器与分析柱之间,作用主要两方面:1.截留不溶性颗粒2.吸附样品基质中的杂质以下几种情况建议使用保护柱:1.中药、天然产物及合成中间体等基质较复杂的样品分析——因溶解性差异导致样品析出而污染分析柱的情况比较严重,梯度洗脱时影响更大。2.生物样品分析——因样品的不可逆吸附导致的污染,保护柱可先于分析柱承受这种污染,从而延长分析柱寿命。保护柱很重要,但选择合适的保护柱...
UHPLC是一种专门的色谱方法,与HPLC相比,它运行速度更快、分辨率更好并且使用的溶剂更少。UHPLC通过使用填充较小颗粒(通常直径小于2µm)的较小色谱柱来实现这一点。生物化学、细胞和分子生物学、临床医学和许多其他领域的研究人员依靠UHPLC从混合物中分离不同类型的分子——无论这些分子是蛋白质、肽、代谢物、药物化合物还是其他化学物质。尽管UHPLC的性能明显更好,但它并不总是*。在您考虑改用UHPLC时,恒谱生将帮助您区分重要和不重要的内容。一、为什么选择UH...