如何分析高效液相色谱图？

高效液相色谱法中，对色谱图分析是很重要的。你可以将色谱图看成一个横纵坐标为时间与数据的二维图。固定相则是像海绵一样的柱子，里面很多孔洞让样品流动，由于每个样品物质的吸附能力不同，在色谱图中会有不同的峰形。保留时间是样品通过高效液相色谱柱所需要的时间，你在使用相同的流动相和色谱柱分析同一样品时，出现的保留时间应该是固定的。如果保留时间不同可能是里面有杂质造成影响。在液相色谱分离过程中，容易出现色谱图中未出峰、一个或者多个峰是负峰、宽峰、双峰、拖尾峰等问题，我们称之为鬼峰。鬼峰来...

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HPLC溶剂选择中的关键考虑因素

选择用作HPLC分析流动相的溶剂是色谱分析过程的关键步骤。到现在为止，没有一种能够满足所有分析需求的通用溶剂，而且根据分析要求所使用的溶剂组合会变得更多。选择合适的溶剂是根据其物理性质以及与样品、色谱柱固定相的相容性。流动相溶剂选择的一般要求是：溶剂应当是高纯度，溶剂与固定相不互溶，并能保持色谱柱的稳定性，建议使用纯水或者液相色谱专用的溶剂；溶剂的性能与使用的检测器应当匹配；溶剂对样品应有足够的溶解能力，样品要*溶于流动相。如果有不溶的样品将导致流动相分离或悬浮，会导致后续一...

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高效液相色谱法基础知识概述

目前已知的化合物中，80%都需要用高效液相色谱法来分析，它以快速、高效、灵敏度好、分离效率高和适用范围广等特点在各领域成分测定中得到肯定与使用，药典将液相色谱法作为许多成分测定的标准分析方法。高效液相色谱法是在经典液相色谱法的基础上建立起来的，HPLC的不同之处在于，它需要更加粒径小的色谱硅胶填料，更高压力的泵、柱效更好的高效色谱柱。粒径更加小的色谱填料意味着能有更高的柱效，但是这样也带来液相系统内部压力增大的问题。系统内部压力高，对泵、色谱柱、保护柱、管路都是一个考验。uH...

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液相色谱柱的使用误区，要记住了

液相色谱柱在色谱仪分析系统中起着分离作用，是色谱分析的核心部件。正确使用和维护色谱柱尤为重要，使用不当会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。以下从几个方面简答介绍液相色谱柱在使用过程中应当着重注意的问题。一、避免压力和温度的急剧变化温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况；柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料，因此在调节流速时应该缓慢进行，以保持色谱柱内填料的稳定性。二、避免直接改变溶剂的组成在需要改变检测样品溶液组成是，应逐渐改变溶剂的组成，特别是反相色谱中，...

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选择HPLC流动相的溶剂应遵循什么原则？

流动相被称为HPLC系统的生命线，它起着至关重要作用：将样品输送通过分离柱，然后输送至检测器以鉴定分离出的成分。流动相通常很少是单一的溶剂，它是水与有机溶剂相组合制成，比如水与极性溶剂的缓冲液或有机溶剂按所需比例混合组成。常用的两种操作模式是：等度洗脱—在等度模式下，流动相的组成在整个分析过程中保持不变。即混合物中溶剂的比例是预先确定的，并且在分析过程中只使用这一种流动相溶剂。梯度洗脱—通过软件以预定模式通过分析运行改变组成，运行结束时溶剂的比例与初始比例不同。在进行色谱分析...

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