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什么是保护柱,它们在hplc分析中有什么作用?

点击次数:89 发布时间:2021-07-07

        HPLC系统能否有效运行取决于流动相和样品不受化学杂质或固体悬浮液的影响。对于HPLC流动相的处理和使用注意事项讨论主要围绕在流动相的制备和使用中应采取的措施。对于样品过滤的重要性讨论主要围绕在进样时清洁样品的好处。

        HPLC色谱柱是HPLC系统中的重要组成部分,使用时需要细心使用,用完后要维护避免下次使用发生问题。经常更换色谱柱是很昂贵的,因此为了节约成本,需要较大程度地延长色谱柱的使用寿命。同时也要细心维护色谱柱,以便每次获得结果保持准确性和一致性。

        由于经常使用色谱柱,化学杂质和固体悬浮液颗粒等会逐渐积累,色谱性能在使用过程中开始下降。流动相或样品中存在的大颗粒杂质开始沉积在色谱柱的入口上,从而干扰流动的均匀性。较小的颗粒会导致背压增加,导致阻塞固定相中的流路。

 

        污染物有哪些?

        1、反相分离中高度保留的化合物,例如脂肪酸。

        2、不可逆地保留的化合物,如残留的蛋白物质,在样品提取时并未完全去除。解决这个问题可以在HPLC分析之前对样品中的蛋白质进行去蛋白化。

        3、颗粒杂质,可能是样品未过滤,系统组件(例如泵或进样器中的密封件)的磨损导致产生颗粒杂质。又或者是进样时溶剂中本身还有颗粒物杂质,没有过滤导致颗粒物质进入系统。建议使用溶剂进样口过滤器,过滤掉微小颗粒物质,避免进入到HPLC系统中。

        恒谱生2μ,5μ,10μ,20μm液相色谱仪流动相入口溶剂过滤器,保护泵、单向止回阀 、进样器 、色谱柱免受有害颗粒污染物的损坏;吸滤阻力较小,较大的圆柱形筛板表面积,几乎没有背压;吸滤头尺寸较小,可用于多种小瓶口的存储池容器;不会将空气引入系统,无气泡进入流动相管路,储液瓶溶剂抽取利用率可达99%以上,大大减少瓶底溶剂因无法净真空吸取而造成的浪费;设有多阶管路接头,兼容多种内径溶剂流动相管路,不需要更换吸滤头即可匹配不同规格的吸管;产品兼 容性高,适用于各种品牌的HPLC系统。

 

        4、柱内残留缓冲液,干燥后导致结晶沉淀。使用色谱柱后用HPLC级纯水或缓冲溶液洗涤色谱柱可防止此类盐沉淀的形成。

        什么是保护柱?

        保护柱是安装在进样器和分析柱之间的,截留导致色谱柱筛板堵塞、柱头塌陷和柱效下降的化学物质和颗粒物。化学物质和颗粒物会污染、堵塞色谱柱,给分析带来不良影响等。这时通过在色谱柱前安装分析保护柱可以防止其产生,能起保护色谱柱的作用。保护柱最好与分析柱具有相同的填料,以消除分离的复杂性。保护柱的内部ID应与分析柱相当 ,以最小化背压。保护柱需要定期更换,可根据例如背压增加,峰展宽和峰保留时间的变化来决定更换的周期。

        恒谱生建议您可以有效地利用、定期更换色谱保护柱,以延长色谱柱的寿命。

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