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你知道uhplc操作中常见故障怎么解决吗?

点击次数:90 发布时间:2021-07-13

        首先我们要知道UHPLC 是什么,它的全称是超高效液相色谱(Ultra-High Performance Liquid Chromatography),是色谱分离科学中的一个全新类别与新技术。在制造技术、扩散体积和耐受压力方面进行了优化,采用小颗粒的固相,增加了分析的通量、灵敏度及色谱峰容量,最大限度的发挥色谱性能。

        色谱仪器作为一种精密仪器,一些不正确的操作或者忽视的实验步骤,会导致仪器分析效果的不佳,甚至对仪器造成伤害。其中,最多出现的一些柱压、漂移和峰型异常的问题,比如鬼峰、肩峰、峰型不准等。

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        故障1:出现肩峰

        可能是样品浓度太高,有浓度超载的情况。可以用流动相配样,总的样品体积小于第一峰的15%。如果样品溶剂过强则采用较弱的样品溶剂。也可能是出现了色谱柱塌陷的问题,如果出现了柱塌陷可以更换色谱柱或者打开进液端,用和柱填料相同的固定相修补。也可能是由于样品中有一个和它极性非常接近的物质,两者没办反完全分离,所以就出现了肩峰的状况。

        故障2:出现鬼峰

        对于等度色谱来说,出现鬼峰的原因主要是回收流动相、过载和沉淀、流路产生;对于梯度色谱,主要原因是溶液中有杂质的情况以及样品中含蛋白质。很多情况下鬼峰的出现都是由于杂质颗粒物、蛋白质沉淀物和化学污染物引起的。在市场上有多款产品主要是针对固体颗粒物的拦截,但是对引起鬼峰出现的有机污染物却不能起到拦截效果。恒谱生精心研发出一款鬼峰捕集小柱可以有效吸附去除系统中的极性较弱的杂质,从而防止系统中的杂质峰对目标峰的干扰。其安装在梯度混合器和进样器之间,不仅能够去除流动相中的杂质,还可以有效的去除管路和混合器中的杂质。

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        故障3:出现峰拖尾

        出现峰拖尾的现象情况有很多,比如样品进样量过大,或者是样品浓度太高导致柱超载,这时应该降低样品量,增加柱直径采用较高容量的固定相。

        也可能是死体积或柱外体积过大,色谱柱柱效下降、柱头塌陷等情况,可以更换合适的色谱柱,或者在色谱柱前加一个保护柱。恒谱生分析/制备保护柱可以起到截留导致色谱柱筛板堵塞、柱头塌陷和柱效下降的化学物质和颗粒物。样品和流动相的过滤可以维护保护柱对化学污染物的吸附容量,能够更长时间的维护柱效。

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