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如何正确选择分析保护柱?

发布时间:2022-03-23      点击次数:223
  分析保护柱是液相色谱分析中重要的色谱耗材,使用保护柱可大大降低分析柱受污染的程度,延长分析柱使用寿命。
  保护柱位于进样器与分析柱之间,作用主要两方面:
  1.截留不溶性颗粒
  2.吸附样品基质中的杂质
  以下几种情况建议使用保护柱:
  1.中药、天然产物及合成中间体等基质较复杂的样品分析——因溶解性差异导致样品析出而污染分析柱的情况比较严重,梯度洗脱时影响更大。
  2.生物样品分析——因样品的不可逆吸附导致的污染,保护柱可先于分析柱承受这种污染,从而延长分析柱寿命。
  保护柱很重要,但选择合适的保护柱更重要,选择或使用不当也可能带来截然相反的效果。
  分析保护柱分类及选择:
  从材质上分:不锈钢材质和PEEK(聚醚醚酮)材质
  PEEK材质优缺点——样品对金属离子比较敏感时,选择PEEK材质比较合适,比如某些蛋白分析会用到PEEK材质的分析柱,主要就是考虑到这方面的因素;
  不锈钢材质优缺点——大部分小分子化合物的分析,选择不锈钢材质保护柱居多,特别是当流动相体系使用到四氢呋喃(THF)或DMSO等一些溶解性较强的溶剂时,必须选择不锈钢材质,甚至对于HPLC系统的管路也需要替换成不锈钢材质,因THF对于PEEK管路有相当强的腐蚀作用。
  从结构上分:卡套式(柱芯+柱套)和直接填装短柱
  直接填装短柱优缺点——这种结构的保护柱实质就是短的色谱柱,一般填装的填料跟分析柱填料完全一样。生物样品分析中,用这种类型保护柱居多,除可过滤一些不溶颗粒外,还可除去一些在分析柱上易吸附的杂质。缺点是,一次性使用,污染严重时,只能报废。
  卡套式保护柱优缺点——卡套式保护柱的柱套可反复使用,柱芯污染后可替换,厂家会提供配套的保护柱芯,但购买时需要注意,柱芯中有与分析柱匹配的填料,需要确认柱芯中的填料类型再购买。同时,柱芯和柱套需是来源于同一厂家的同一规格,否则,会存在匹配上的差异,导致峰型异常或者漏液。
  从连接方式上分:独立式和直连式
  独立式分析保护柱优缺点——保护柱和分析柱之间用一段管路连接,不用担心与分析柱在连接上的匹配问题。但使用管路连接时,连接不当容易产生死体积。
  直连式保护柱优缺点——保护柱接口带螺纹,可直接与分析柱连接,死体积小,UPLC分析时建议选择直连式保护柱;缺点:购买时需保证接口与分析柱匹配。
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