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来看看反相色谱柱主要是应用在哪里

发布时间:2022-09-16      点击次数:67
  反相色谱是迄今在高效液相色谱中应用较广泛的技术,主要是因为它适用于分析极大多数的非极性物质和很多的可离子化的及离子化合物。大多数用于反相色谱的固定相都是天然的疏水物质,因此,分析物是按照它们与固定相的疏水相互作用的大小来分离的,含有疏水的机制也能以同样的保留方式分离。
  反相色谱柱利用各种流动相和添加物可以有很多的应用,一些技术利用添加物可以改变或修饰填料的表面,有时候这些添加物有可能会污染键合相表面。
  硅胶表面因为有着疏水键合相而有一些别的化学性质,残留的硅烷醇存在于所有的硅胶键合填料中,这些硅烷醇具有弱酸性,因此能与某些待分析物合基质成分,特别是碱性成分。因为硅烷醇的pKa值大约是4.5,离子化能在中性pH条件下发生因此与阳离子产生静电相互作用就有可能发生。较老的A型硅胶能容纳高浓度金属离子(有时候100ppm或更多),而这能使硅胶表面的酸性更大甚至能发生金属鳌合现象或清除一些化合物。残留硅烷醇在非末端封闭的硅胶合短链键合相如C2或C4上更让人烦恼。
  反相色谱柱使用者必须清楚他们所用的固定相表面特殊性质和可能的分析物-固定相表面的相互作用,这样当他们使用反相方法时才能考虑到可能的基质相互作用。例如,非常疏水的样品基质如玉米油,高芳香物质,和蜡能粘住固定相装填表面并且改变他们的性质。含有蛋白质物质的生物流体也能吸附在装填表面。尽管分析者想尽最大努力来保护HPLC柱子,某些分析物-基质污染能使固定相受到有害的影响。
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