浅析ODS填料的操作要点及注意事项

　　ODS填料的粒度主要影响填充柱的两个参数，即柱效和背压。粒度越小，其表面积越大，填充柱的柱效超高；然而粒度越小，柱压越大，柱压的增加限制了粒度小于3pm的ODS填料应用。在相同选择性条件下，提高柱效可提高分离度，但不是因素。

　　如果固定相选择是正确，但是分离度不够，那么选用更小粒度的ODS填料是很有用的。3umODS填料填充柱的柱效比相同条件下的5pmODS填料的柱效提高近30%；然而，3um的色谱柱的背压却是5um的2倍。与此同时，柱效提高意味着在相同条件下可以选用更短的色谱柱，即相同的塔板数或分离能力，但是柱长更短，以缩短分析时间。另外，可以采用低粘度的溶剂做流动相或增加色谱柱的使用温度，比如用乙睛代替甲醇，以降低色谱柱的压力。

　　ODS填料操作要点

　　1.首先对流动相进行过滤，根据需要选择不同的滤膜，一般为有机系和水系，常用的孔径为0.20um和0.45um。

　　2.对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。

　　3.正常情况下，仪器首先用甲醇冲洗10-20分钟，然后再进入测试用流动相(如流动相为缓冲试剂，则要二次重蒸水冲洗10-20分钟，直至色谱柱中有机相冲净为止)。

　　4.一般情况下，流动相冲洗20-30分钟后，仪器方可稳定，重要的是仪器基线走后，方可进样测试。

　　5.同时进两针标样，将其结果相比较，其结果的比值在0.98-1.02之间后，就可以正式进行样品的测试了。

　　6.样品测试结束后，就要进行色谱仪及色谱柱的清洗和维护。如流动相为缓冲试剂，同样也要用重蒸水清洗10-20分钟，方可用有机相进行保护，否则，有损色谱柱。

　　7.关机时，先关计算机，再关液相色谱。

　　8.填写登记本，由负责人签字。

　　ODS填料注意事项

　　1.流动相均需色谱纯度，水用20M的去离子水。脱气后的流动相要小心振动尽量不引起气泡。

　　2.柱子是非常脆弱的，次做的方法，先不要让液体过柱子。

　　3.所有过柱子的液体均需严格的过滤。

　　4.压力不能太大，不要超过150kgf/cm2。

　　5.因为缓冲试剂遇有机溶剂，会结晶，有损色谱柱，所以，每次由有机相变流动相或流动相变有机相均需用蒸馏水清洗。