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  • 高效液相色谱仪是进行定量分析,杂质检查等分析工作中主要的精密仪器,液相色谱柱是液相色谱仪的最核心部件。在这里,介绍一下液相色谱柱使用中的注意事项及使用心得。液相色谱柱使用心得:柱头类型和不锈钢毛细管接头的匹配色谱柱是消耗品,不是仪器原配的情况很多,如果接头和柱头深度匹配将会产生漏液或者死体积过大的现象。接头比柱头深度长,不易拧紧而漏液;接头比柱头深度短,柱头内留有空隙而产生死体积,使谱带展宽和峰拖尾。溶剂的匹配转换液相色谱柱内保存溶剂和仪器系统内存留溶剂,如果和流动相不匹配,... 查看更多
  • 制备柱具有各种尺寸,可以实现高分辨率分析和快速的分析。在制备色谱中,达到高纯度、高回收率和高通量的分离十分重要。制备柱主要应用在植物化学、药物合成、生物化学等领域的产品的提取及纯化工作中。不同的工作领域中组分的制备和纯化量的差异较大。在生物技术领域中,酶的分离是μg级;在天然产物化学和合成化学领域中,为应对未知成分定性鉴别、结构测定、生物活性测试等要求,需要纯化若干mg级的高纯物;在药品和医药学测试中,需要g级的标准品和对照品;在工业级提纯中,目标产物工业化生产往往需要... 查看更多
  • 1.高压匀浆法装填液相色谱柱将填料悬浮在适宜的匀浆液中制成匀浆,在其尚未沉降之前,很快以高压泵将其以很高的流速压进柱中,便可制备出填充均匀的柱子。这是常见的分析和制备色谱柱的装填方法。2.湿法装填对于柱、特别是现在流行的以3-10μm细柱径填料填装的分析柱,则必须使用湿法,即匀浆法装柱。因为,随着粒径的缩小,因静电作用和表面能的加大,粒子间倾向于聚集和“粘结”,若以干法填装,它们会粘附在连接管及柱壁上,也会因强烈的静电作用彼此排斥,因而难以填装出... 查看更多
  • C18色谱柱因键合方式的不同、粒径的不同、长度的不同,内径的差异等多方面因素,呈现出不同选择性。柱填料的选择关系到色谱分离的可能性,而柱规格的选择直接影响分析速度、分离能力、检测能力及每次分析的溶剂消耗等。柱规格包括两方面:柱内径和柱长度。柱内径,分析型一般为2~6mm,制备型20mm,大者可达80mm;柱长度,分析型5~30cm,制备型15~50cm。一般来说,柱内径不影响分离度与分析时间的关系。今天,柱技术已发展到不同柱内径的柱子能够具有相同的性能。不同内径的柱子又各具特... 查看更多
  • 日常分离分析工作中,c18液相色谱柱的使用和维护十分重要,液相色谱柱使用是否得当,直接影响柱子的寿命,稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。液相色谱柱的正确使用:(1)柱子在装卸、更换时,动作要轻,接头拧紧要适度。必须防止较强的机械振动,以免柱床产生空隙。(2)如果仪器用来做常规分析,样品种类有限,但分析次数多,则不妨为每一类常规分析配置一根专用柱,这样有助于延长柱子的寿命。(3)避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的... 查看更多
  • 1)在pH值正常范围内(2~8)可选用现代高纯硅胶色谱柱,具有峰形好,重现性高和寿命长的特点,选用较短的柱子可以提高分离效率,选用较长的柱子可以增加保留,选用小颗粒度的填料可以提高分离度,对分子量大的组分宜选用大孔径填料的色谱柱。2)分离极性大的组分(流动相水相过大)采用AQ类似的色谱柱。3)分离生物碱类的化合物选用经过烷基化处理封口的填料可防止碱性化合物的拖尾现象。4)极端酸性条件下(pH小于2)选用ZorbaxStableBondC18类色谱柱或者宽pH值色谱柱。5)低端... 查看更多
  • 影响C18色谱柱寿命的几个因素主要包含:流动相因素,样品因素与其他因素。色谱柱使用过程中应该注意这些因素,才能有效增加使用寿命。一、流动相因素1、流动相pH不同基质的填料具有不同的pH适用范围。常温下无定形硅胶在纯水中的溶解度约为100mg/L-1,且在pH1~9的范围内溶解的硅胶量几乎是常量,考虑到溶解速度的影响,对于硅胶基质的填料,其所能承受的流动相pH范围约为1~8。键合相硅胶填料则由于键合层的屏蔽作用,使填料对流动相的适应范围大大增加,如现在广泛使用的反相色谱填料C1... 查看更多
  • 液相色谱是世界各地实验室使用的流行纯化技术。如果系统设置和操作正确,它可以立即从混合物中分离出所需的化合物。学习如何使用和制备缓冲液和溶剂是能提高系统性能的重要技巧之一。准确制备和正确选择缓冲液对于在液相色谱中获得可重复的结果至关重要。一、了解您的化合物如果您正在寻找混合物中的特定化合物,您应该使用最能将您的分析物与其他分析物分开的缓冲液/溶剂组合。例如,了解极性和溶解度(极性或非极性)、电离、您正在寻找的紫外吸光度将有助于指导您使用特定的色谱柱和溶剂组。二、纯度使用较低等级... 查看更多
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