在高效液相分析检测样品的过程中，液相保护柱会受到来自于样品及色谱系统的污染，从而导致色谱柱耐用性差、寿命缩短。来自于色谱系统的污染主要指，HPLC仪器系统中部件磨损而产生的固体颗粒，以及流动相系统过滤不全部残留的固体颗粒。来自于样品的污染主要指，未全部溶解的样品或者已全部溶解的样品进入色谱系统中，由于样品溶剂和流动相溶剂对样品溶解存在的溶解度差异，导致沉淀析出污染系统。特别是对于中药、天然产物、合成中间体及生物药品的检测，因基质的复杂性，色谱柱受污染的情况会更加严重。污染会导...

在正相色谱中，一般采用极性键合固定相，硅胶表面键合的是极性的有机基团，键合相的名称由键合上去的基团而定。常用的有氰基(-CN)、氨基(-NH2)、二醇基(DIOL)键合相。流动相一般用比键合相极性小的非极性或弱极性有机溶剂，如烃类溶剂，或其中加入一定量的极性溶剂(如氯仿、醇、乙腈等)，以调节流动相的洗脱强度。通常用于分离极性化合物。一般认为正相色谱的分离机制属于分配色谱。组分的分配比K值，随其极性的增加而增大，但随流动相中极性调节剂的极性增大(或浓度增大)而降低。同时，极性键...

溶剂混合时气泡的形成会导致液相色谱分析中的许多问题，这些问题可以通过对流动相进行脱气来避免。当溶剂混合时，空气的溶解度低于同比例的纯溶剂，过量的空气会从溶液中析出/冒泡。脱气是用来描述溶解气体从溶液中出来的术语。这种现象也可能发生在HPLC系统中，其中粗糙的表面会产生气泡形成的成核位点。由于产生死体积，气泡还可以改变流动相通过色谱柱的流量。在HPLC分析中，通过对流动相脱气，可以在很大程度上避免因气泡形成而产生的问题。一、HPLC系统中的除气1.低压混合：低压混合系统更容易形...

在日常分离分析工作中，高效液相色谱柱的使用和维护十分重要，色谱柱使用是否得当，直接影响色谱柱的寿命，稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。在色谱操作过程中，需要注意下列问题，以维护色谱柱。高效液相色谱柱的正确使用：（1）柱子在装卸、更换时，动作要轻，接头拧紧要适度。必须防止较强的机械振动，以免柱床产生空隙。（2）如果仪器用来做常规分析，样品种类有限，但分析次数多，则不妨为每一类常规分析配置一根专用柱，这样有助于延长柱子的寿命。（3）避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动...

高效液相色谱系统(HPLC)是指分析化学中的一种技术,用于识别、分离和量化混合物中的每种成分。C8和C18均指色谱柱键合面的烷基链，都用于高效液相色谱系统。一、什么是C18：C18柱、C8柱和C4柱都是直链烷基硅烷相。C18是辛基癸基硅烷，含有18个与二氧化硅结合的碳。因此C18比C8（8个碳）或C4（4个碳）具有更多的碳和更长的碳链。由于额外的碳，C18具有更大的表面积，流动相必须穿过。这在键合相和洗脱物之间提供了更多的相互作用时间。因此，样品洗脱得更慢，分离度更高。C18...

一、HPLC色谱柱的安装：首先检查色谱柱与仪器的连接和管道是否匹配。使用色谱柱测试程序中建议的过滤和脱气流动相冲洗您的HPLC泵和管路。确保系统中没有气泡。将流速设置为0.1mL/min并连接到色谱柱入口，确保流速沿色谱柱上箭头指示的方向。拧紧进入色谱柱的末端接头，将流速增加到1mL/min（仅适用于4.6mmID色谱柱）持续5分钟。在连接到流通池之前，停止流动并擦拭色谱柱的出口端以去除其他任何的颗粒。将色谱柱出口连接到流通池，以1mL/min的速度将大约10个色谱柱体积通过...