1.硅胶色谱柱的平衡 硅胶色谱柱由工厂测试后是保存在水中的。新柱应先使用10-20倍柱体积的甲醇冲洗硅胶色谱柱。请一定确保您分析样品所使用的流动相和水互溶。每天用足够的时间以流动相来平衡硅胶色谱柱，您就会在处理问题方面获得的"补偿"，而且您的硅胶色谱柱的寿命也会变得更长!操作步骤： a.平衡开始时将流速缓慢地提高，用流动相平衡硅胶色谱柱直到获得稳定的基线（缓冲盐或离子对试剂流速如果较低，则需要较长的时间来平衡）
b.如果使用的流动相中含有缓冲盐，应注意用纯水"过渡"即每天分析开始前必须先用纯水冲洗30分钟以上再用缓冲盐流动相平衡;分析结束后必须先用纯水冲洗30分钟以上除去缓冲盐之后再用甲醇冲洗30分钟保护柱子。
2.硅胶色谱柱的再生
长期使用的硅胶色谱柱，往往柱效会下降（柱子的理论塔板数减低）。可以对硅胶色谱柱进行再生，在有条件的实验室应使用一个廉价的泵进行柱子的再生。
建议用来冲洗柱子的溶剂体积
硅胶色谱柱尺寸柱体积所用溶剂的体积
125-4mm1.6ml30ml
250-4mm3.2ml60ml
250-10mm20ml400ml
选择再生方法：
极性固定相（如Si，NH2*，DIOL基色谱填料）的再生：
正庚烷→→乙酸乙酯→丙酮→乙醇→水**
非极性固定相（如反相色谱填料RP-18，RP-8，CN等）的再生：水→乙腈→（或异丙醇）→乙腈→水
注意：
a.在对NH2改性的硅胶色谱柱进行再生时，由于NH2可能以铵根离子的形式存在，因此应该在水洗后用0.1M的氨水冲洗，然后再用水冲洗至碱溶液*流出稀硫酸可以用来清洗已污染的硅胶色谱柱，如果简单的用有机溶剂/水的处理不能够*洗去硅胶表面吸附的杂质，在水洗后加用0.05M稀硫酸冲洗非常有效。
3.硅胶色谱柱的维护
a.使用预柱保护分析柱（硅胶在极性流动相/离子性流动相中有一定的溶解度）
b.大多数反相硅胶色谱柱的pH稳定范围是2-7.5，尽量不超过该硅胶色谱柱的pH范围
c.避免流动相组成及极性的剧烈变化
d.流动相使用前必须经脱气和过滤处理
e.如果使用极性或离子性的缓冲溶液作流动相，应在实验完毕柱子冲洗干净，并保存于甲醇或乙腈中
f.氯化物的溶剂对其有一定的腐蚀性，故使用时要注意，柱及连接管内不能长时间存留此类溶剂，以避免腐蚀
让色谱分离更有效
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