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  • 温度的变化会对色谱分析方法的重现性和色谱柱的寿命产生重大影响。但为什么会这样?恒谱生在以下的内容将会为您介绍。一、再现性随着温度的变化,液相色谱柱内固定相和流动相之间的热力学会受到直接影响。在不同温度下运行方法可能会影响分析物容量因子(k)或分析物在色谱柱上的保留时间。在升高的温度下,流动相和分析物的动能都会增加。分析物动能的增加将导致它们更强烈地移动和振动,并将破坏分子间结合,即分析物和固定相之间的分离和保留机制。很多时候,这会导致所有分析物更快地从液相色谱柱中流出,从而缩... 查看更多
  • 缓冲液是一种含有弱酸及其共轭碱(或弱碱及其共轭酸)的水溶液。加入少量强酸或强碱后,缓冲溶液的pH值变化很小,当小的环境因素发生变化时,有助于抵消分析方法中的条件变化。缓冲溶液用于将pH值保持在几乎恒定的值。由于这种弱酸(HA)与其共轭碱之间存在平衡,它们对pH变化具有抵抗力。一、hplc缓冲液的工作原理当一些强酸(更多的H+)被添加到弱酸及其共轭碱的平衡混合物中时,根据LeChatelier原理,平衡向左移动。类似地,如果将强碱添加到混合物中,则氢离子浓度降低的量小于所添加碱... 查看更多
  • 影响hplc色谱柱寿命的几个因素主要包含:流动相因素,样品因素与其他因素。色谱柱使用过程中应该注意这些因素,才能有效增加使用寿命。一、流动相因素1、流动相pH不同基质的填料具有不同的pH适用范围。常温下无定形硅胶在纯水中的溶解度约为100mg?L-1,且在pH1~9的范围内溶解的硅胶量几乎是常量,考虑到溶解速度的影响,对于硅胶基质的填料,其所能承受的流动相pH范围约为1~8。键合相硅胶填料则由于键合层的屏蔽作用,使填料对流动相的适应范围大大增加,如现在广泛使用的反相色谱填料C... 查看更多
  • 液相色谱的柱子通常分为正相柱和反相柱。正相柱大多以硅胶为柱,或是在硅胶表面键合-CN,-NH3等官能团的键合相硅胶柱;反相柱填料主要以硅胶为基质,在其表面键合非极性的十八烷基官能团(ODS)称为C18柱,其它常用的反相柱还有C8,C4,C2和苯基柱等。另外还有离子交换柱,GPC柱,聚合物填料柱等。液相保护柱在使用中最常见的问题:就是柱压升高,如果柱压是在长时间使用过程中缓慢增加,属于正常现象。但柱压在使用过程中突然升高(系统管路堵塞及压力传感器故障除外),可能的原因有如下几点... 查看更多
  • .氨基柱既可以正相使用,也可以反相使用,但是要注意到的是:正相溶剂和反相溶剂往往是不互溶的,正常情况新氨基柱保存在正相环境中,例如LUNA氨基柱保存在正己烷-乙腈(99:1)中。正相使用新柱子可直接用流动相。推荐先用正己烷-乙腈(99:1)以0.5ml/min的流速冲10倍柱体积,再根据流动相选用极性相近的氯仿或二氯甲烷以相同的流速冲10倍柱体积,最后换成流动相。正相使用时,不宜分析含醛基、羰基的化合物,不可用于还原糖的分析;流动相要彻底脱气,并不得含有羰基化合物和过氧化物(... 查看更多
  • 高效液相色谱柱是高效液相色谱的心脏,在高效液相色谱仪的使用中,保持色谱柱的柱效、容量和渗透特性,延长柱子的使用寿命非常重要。色谱柱使用时间后就会出现柱压升高、柱效降低、峰形畸变和分离度降低、保留时间改变等变化,如不采取措施,将会缩短色谱柱的使用寿命,影响工作效率,并造成一定的经济损失。因此,有必要加强和规范色谱柱的管理,从而延长色谱柱的使用寿命。本文从影响色谱柱使用寿命的几个因素出发,从管理的角度,探讨色谱柱的维护与保养。影响高效液相色谱柱使用寿命的因素1.流动相在以水溶液为... 查看更多
  • 反相色谱柱为色谱柱提供方便、经济和有效的保护,延长了色谱柱的寿命,分析结果的重现性。随着使用时间的增加,高效液相色谱柱分离效能下降,柱压增高,其原因主要是由于色谱柱进口段的少量填料被污染引起的,而色谱柱整个柱床并未被破坏,使用保护柱,相当于在色谱柱前增加了一段额外的填料,起到了保护整个色谱柱的作用。反相色谱柱特点:采用高度可控的单分子层形成和封尾技术;高的柱间重现性;高的选择性和分离效率;适合分离酸性、中性和碱性化合物,以及许多药物和多肽等。反相色谱柱在使用缓冲液的过程中还要... 查看更多
  • HPLC色谱仪器可以是一组单独的模块或元件,但也可以设计为单个装置。模块概念在单个组件失效的情况下更加灵活;此外,系统各个零件不必来自同一制造商。如果您不喜欢自己进行小修,您会更喜欢紧凑型仪器。然而,这并不需要比模块化套件更少的工作台空间。一台HPLC仪器至少具有溶剂罐、带筛板的传输线、高压泵、进样装置、色谱柱、检测器组成部分。一、高效液相色谱仪HPLC仪器通常由九个基本组件组成:流动相/溶剂容器、溶剂输送系统、样品引入装置、色谱柱、柱后装置、检测器、数据收集和输出系统、检测... 查看更多
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