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高效液相色谱(HPLC)是一种流行且用途广泛的技术,可为复杂有机样品的成分的分离、鉴定和定量提供经济实惠的解决方案。了解各个组成部分以及每个组成部分如何有助于分析的整体可靠性非常重要。一、高效液相色谱及其部件介绍系统主要组成部分为:泵、探测器;根据应用产生无限数量的其他配置。比如流动相、色谱柱、管线、保护柱等。二、什么是高效液相色谱?HPLC是一种用于分离、鉴定和量化混合物中成分的技术。特别适用于不易挥发、热不稳定和高分子量的化合物。1、流动相液相以恒定速率泵送到装有固定相的...
柱层析被描述为一种色谱常用的技术,其中待分离的物质被置于装有吸附剂(固定相)的柱子的最高点上,以不同的速率通过柱子,这取决于每种物质对吸附剂的亲和力。吸附剂和溶剂或溶剂混合物,并且通常在不同时间从柱中通过时聚集在溶液中。两种最常见的柱色谱固定相是硅胶和氧化铝,而有机溶剂被认为是最常见的流动相。一、柱层析原理柱层析的主要原理是在固定相的帮助下吸附溶液中的溶质,然后将混合物分离成独立的成分。当流动相与需要分离的混合物一起从色谱柱顶部进入时,混合物中的各组分以不同的速率运动。与对固...
使用高效液相色谱(HPLC)分析样品广泛应用于药物成分分析、食品添加剂测定和环境样品测试是目前普遍的一个方法。由于液相色谱柱在许多实验室中是核心设备且价格昂贵,因此保护其免受损坏是延长色谱柱寿命和降低成本的首要考虑因素。维护良好的色谱柱还可产生一致、准确的数据,支持可靠的分析结果。1.如何提高色谱柱的性能?色谱柱性能取决于许多因素,包括样品特性、不溶性颗粒的存在以及使用后的清洁和维护。然而,并非所有的实验条件在使用期间都是理想的。例如,一些样品具有苛刻但必要的pH条件。因此,...
c18液相色谱柱在使用中常见的问题就是柱压升高,如果柱压是在长时间使用过程中缓慢增加,属于正常现象。但柱压在使用过程中突然升高,可能的原因有如下几点:1、液相色谱柱头的过滤筛板堵塞或污染;2、色谱柱头的填料被样品污染;3、色谱柱内缓冲液中的盐遇到高浓度的甲醇或其他有机溶剂,形成结晶析出;4、流动相pH值过大或过小使固定相结构破坏或溶解。液相色谱柱解决办法如下:1、如确定是色谱柱头的过滤筛板被污染,可以将色谱柱反方向用甲醇冲洗至正常压力,或者卸下色谱柱头,将其放在10%的稀硝酸...
高效液相色谱仪是进行定量分析,杂质检查等分析工作中主要的精密仪器,液相色谱柱是液相色谱仪的最核心部件。在这里,介绍一下液相色谱柱使用中的注意事项及使用心得。液相色谱柱使用心得:柱头类型和不锈钢毛细管接头的匹配色谱柱是消耗品,不是仪器原配的情况很多,如果接头和柱头深度匹配将会产生漏液或者死体积过大的现象。接头比柱头深度长,不易拧紧而漏液;接头比柱头深度短,柱头内留有空隙而产生死体积,使谱带展宽和峰拖尾。溶剂的匹配转换液相色谱柱内保存溶剂和仪器系统内存留溶剂,如果和流动相不匹配,...
制备柱具有各种尺寸,可以实现高分辨率分析和快速的分析。在制备色谱中,达到高纯度、高回收率和高通量的分离十分重要。制备柱主要应用在植物化学、药物合成、生物化学等领域的产品的提取及纯化工作中。不同的工作领域中组分的制备和纯化量的差异较大。在生物技术领域中,酶的分离是μg级;在天然产物化学和合成化学领域中,为应对未知成分定性鉴别、结构测定、生物活性测试等要求,需要纯化若干mg级的高纯物;在药品和医药学测试中,需要g级的标准品和对照品;在工业级提纯中,目标产物工业化生产往往需要kg级...