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c18液相色谱柱为何会出现柱压突然升高?

发布时间:2022-05-25      点击次数:908
  c18液相色谱柱在使用中常见的问题就是柱压升高,如果柱压是在长时间使用过程中缓慢增加,属于正常现象。但柱压在使用过程中突然升高,可能的原因有如下几点:
  1、液相色谱柱头的过滤筛板堵塞或污染;
  2、色谱柱头的填料被样品污染;
  3、色谱柱内缓冲液中的盐遇到高浓度的甲醇或其他有机溶剂,形成结晶析出;
  4、流动相pH值过大或过小使固定相结构破坏或溶解。
  液相色谱柱解决办法如下:
  1、如确定是色谱柱头的过滤筛板被污染,可以将色谱柱反方向用甲醇冲洗至正常压力,或者卸下色谱柱头,将其放在10%的稀硝酸内超声清洗10分钟,后再用纯水超声10分钟,重新装入色谱柱。
  2、如确定c18液相色谱柱头的填料被污染,将柱头螺丝卸下,挖出柱内前段被污染的填料,用相同的柱填料重新填入,仔细修复后,重新安装上柱头螺丝。
  3、如确定定是盐结晶,用10%的甲醇/水冲洗液相色谱柱使柱内盐全部溶解,再换高浓度甲醇。
  4、如果因pH值使用不当,很难恢复。
  液相色谱柱样品制备
  1、样品应当尽可能溶解在能与流动相相互溶的溶剂中。除特殊指明外,如使用强溶剂溶解样品柱子的分辨率将可能降低。
  2、样品溶液在进样前应使用针头式过滤器对样品预先过滤。频繁改变流动相组成,会加速降低柱效。
  3、c18液相色谱柱由高压匀浆法装填,能承受较高压力。为获得*分离效果,使用时请不要超过200kgf,而且避免压力突然上升或变化,否则会造成硅胶填料的破坏,减少色谱柱的使用寿命。除特殊要求外最高操作温度不要超过60℃。
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