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使用高效液相色谱(HPLC)分析样品广泛应用于药物成分分析、食品添加剂测定和环境样品测试是目前普遍的一个方法。由于液相色谱柱在许多实验室中是核心设备且价格昂贵,因此保护其免受损坏是延长色谱柱寿命和降低成本的首要考虑因素。维护良好的色谱柱还可产生一致、准确的数据,支持可靠的分析结果。
1.如何提高色谱柱的性能?
色谱柱性能取决于许多因素,包括样品特性、不溶性颗粒的存在以及使用后的清洁和维护。然而,并非所有的实验条件在使用期间都是理想的。例如,一些样品具有苛刻但必要的pH条件。因此,液体分析柱的预防性维护程序有助于最大限度地延长色谱柱寿命并保持HPLC效率。
2.哪些因素会影响色谱柱寿命?
常见的HPLC问题包括柱背压增加、泄漏和无法保持一致的流速。未过滤样品或流动相中的颗粒会导致这些问题,任何进入HPLC系统的物质都有可能将颗粒物质引入色谱柱基质,从而缩短色谱柱的使用寿命。因此,样品必须经过预处理,使用前也需要用溶剂过滤器过滤流动相。
流动相的过滤和脱气将去除微粒和溶解气体,确保它们不会到达并损坏色谱柱。如果流动相含有来自溶解固体材料的缓冲盐或改性剂,则过滤尤其重要。泵低压进口侧使用的恒谱生HPLC溶剂进口过滤器有助于保护止回阀、进样器和色谱柱免受有害颗粒污染物的影响。将此步骤添加到例程中可以帮助减少色谱图中的基线噪声。
使用在线过滤器和保护柱也有助于防止颗粒进入系统和护柱。色谱柱是液相系统中的一个关键组件,这些色谱柱保护器的使用取决于应用,需要一个或两个。恒谱生的色谱保护柱是一种短柱,样品和流动相在进入主柱之前通过该柱,有助于在到达分析柱之前去除杂质和悬浮固体。保护柱的使用取决于具体应用,当色谱行为发生变化时,如背压、保留时间或峰加宽的变化,需要定期更换。
实验中还需要考虑样品和流动相的兼容性,因为一些样品组分会与某些溶剂发生反应。例如,醛和酮与氨基流动相反应。避免反应性组合有助于保护色谱柱免受损坏。