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反相色谱柱在使用缓冲液中需要注意些什么?

发布时间:2022-06-20      点击次数:54
  反相色谱柱为色谱柱提供方便、经济和有效的保护,延长了色谱柱的寿命,分析结果的重现性。随着使用时间的增加,高效液相色谱柱分离效能下降,柱压增高,其原因主要是由于色谱柱进口段的少量填料被污染引起的,而色谱柱整个柱床并未被破坏,使用保护柱,相当于在色谱柱前增加了一段额外的填料,起到了保护整个色谱柱的作用。
  反相色谱柱特点:
  采用高度可控的单分子层形成和封尾技术;
  高的柱间重现性;
  高的选择性和分离效率;
  适合分离酸性、中性和碱性化合物,以及许多药物和多肽等。
  反相色谱柱在使用缓冲液的过程中还要注意以下几点:
  1.避免使用盐酸盐,盐酸盐对钢质有腐蚀作用;
  2.缓冲液要现配现用,往往缓冲液是良好的菌类培养液,隔天或放置长时间实验时会发生很多怪现象;
  3.使用缓冲液要及时掌握pH范围,做到胸中有数;
  4.清洗液路和柱子时,有温控可加热到30摄氏度易于冲洗;
  5.长时间用缓冲溶液要注意观察接头处有无析出,若有白色盐类析出,定期用10%硝酸冲洗液路可以避免液路的堵塞;
  6.反相色谱柱选择缓冲液要用合适的试剂,避免不纯的盐类造成不必要的麻烦;
  过渡流动相是指有机相和水相的组成与分析流动相相同,但是不含缓冲盐的溶液。
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