HPLC的常用数据处理方法

发布时间：2022-08-08 点击次数：345

液相色谱仪的仪器本身是记录样品通过检测器时，吸光度的变化而产生的电信号变化，从而产生色谱谱图，后面的结果就要靠后期的色谱数据处理系统。

谱图处理完即可制作校正曲线，校正曲线是数据处理的重点，是将标样谱图的信息与数据做成一个标准，供处理试样谱图使用。校正是通过分析准备好的标准样品，来确定计算组分浓度的响应因子的过程。接下来介绍常用的数据处理方法：

外标法

外标法是指添加一定量的标准品于空白样品中制成对照样品，与未知检测样品平行进行样品处理并检测，根据对照品响应值与标准品的浓度函数关系计算出未知检测样品中被测组分浓度的定量方法。
内标法

内标法指的是将一定重量的纯物质作为内标物加到一定量的被测样品混合物中，然后对含有内标物的样品进行色谱分析，分别测定内标物和待测组分的峰面积及相对校正因子，按公式计算出被测组分的含量。

两种数据处理方法的区别

内标法是把标准物质加入到被测样品中，外标法不是把标准物质加入到被测样品中，而是在与被测样品相同的色谱条件下单独测定。

1、外标法要求仪器重复性很严格，适于大量的分析样品，因为仪器随着使用会有所变化，因此需要定期进行曲线校正。此法的特点是操作简单，计算方便，不需测量校正因子，适于自动分析。但仪器的重现性和操作条件的稳定性必须保证，否则，会影响实验结果。

2、内标法要求挺严格的，对于内标物的选择要有一定的原则，适于分析样品量较少的情况；不要求样品里的所有组分都出峰，只要内标物和所关注的组分出峰并分离好就可以了；定量准确，对进样量和操作条件的控制不很严格，但必须准确称量试样和内标物，否则会影响实验结果·。

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