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  • 提起生物碱,制药的小伙伴肯定不陌生,它是中草药中最重要也最具有价值的生物活性成分之一。生物碱可分为59种,它们的结构比较复杂,用传统的方法分离效果不佳。高效液相色谱法还没出现之前,对于生物碱的分离纯化一直是学者们的难题。但是,即使使用液相色谱法分离,也会存在许多问题。碱性化合物分析中显著的难题是峰形拖尾,而且碱性越强的时候,就越容易发生拖尾现象。恒谱生和你一起探讨一下峰拖尾该如何避免!1、流动相调节流动相也可以改善峰拖尾的现象,前期在选择流动相的时候,要考虑流动相pH值的范围... 查看更多
  • 液相色谱柱是液相色谱分析的核心,对于填料一直是色谱界研究的热门项目。液相色谱柱的研究可谓是中原逐鹿,竞争十分激烈。液相色谱柱的发展都历经了哪些变化呢?首先是柱子的柱体。从材质上,一开始采用玻璃制作,但是我们都知道玻璃这种东西十分不耐压,液相色谱分析的运行压力越来越高,甚至现在还有超高压液相色谱,用玻璃的柱体是十分不合适的。现在的液相色谱柱的柱管几乎都是用金属制作了。通常采用不锈钢材质,具有高强度、高硬度的同时,不易生锈腐蚀、适用的温度广泛。恒谱生的液相色谱柱柱管就是采用不锈钢... 查看更多
  • 误区1:HPLC柱不可以反冲这是不正确的。通常情况下液相色谱柱所设计的耐压值是远高于最大操作压力的。换柱时反冲可以清洗柱头一些具有强吸附性质的物质,我们冲洗出这些残留物质也是为了防止压力增大。但是如果你购买的色谱柱在柱头使用了大粒度的填料,这时你反冲会冲出这一部分填料。因此你要先检查一下自己使用的液相色谱柱再选择是否反冲。误区2:所有的C18(L1)色谱柱都是一样的这是不正确的。在早期的HPLC体系中,C18是仅有的反向色谱的键合固定相,因此C18就作为了反向色谱柱的标准。但... 查看更多
  • 色谱填料技术又称层析分离技术或色层分离技术,是一种分离复杂混合物中各个组分的有效方法。它是利用不同物质在由固定相和流动相构成的体系中具有不同的分配系数,当两相作相对运动时,这些物质随流动相一起运动,并在两相间进行反复多次的分配,从而使各物质达到分离。如今,色谱技术广泛应用于工业中尤其是食品药品行业,高效液相色谱也逐渐成为了食品药品实验室检测部门的标配。在制药行业,色谱层析制备柱也成了抗体、糖蛋白、抗生素等产品主要的生产设备。色谱填料的选择要点有哪些呢?一、硅胶基质填料硅胶是H... 查看更多
  • 经常做蛋白质纯化分离实验的色谱工作者,对于疏水色谱(Hydrophobicinteractionchromatography,简写HIC)肯定不陌生,血清蛋白、膜结合蛋白、核蛋白、受体、重组蛋白等化合物纯化都需要用HIC色谱法。HIC在是利用样品分子与固定相的疏水力作用的不同,用流动相洗脱时,各组分迁移速度不同而达到分离的目的。疏水相互作用色谱法具有对蛋白质的回收率高,蛋白质不失活,蛋白质变性可能性小等优点。疏水作用色谱固定相的非极性比较弱,流动相多采用高浓度盐缓冲液进行梯度... 查看更多
  • 气相色谱(gaschromatography简称GC)是分离和鉴定低分子量气体或挥发性液体的理想技术,它在工业、农业、国防、建设、科学研究中都得到了广泛应用。气相色谱可分为气固色谱和气液色谱。高效液相色谱法的原理与气相色谱法的原理相同。但是气相色谱不适用于不挥发物质和对热不稳定物质,而液相色谱却不受样品的挥发性和热稳定性的限制,有些样品因为难以汽化而不能通过柱子,热不稳定的物质受热会发生分解,也不适用于气相色谱法。这使气相色谱法的使用范围受到了限制。清楚了解这两种分离技术之间... 查看更多
  • 液相色谱仪是比较常用的实验室仪器,但是即使是经验丰富的人也容易忽略一些小细节,别小看这些被忽略的细节,很可能会影响你的色谱仪器或者是分析结果!一些小故障也是由于不注重细节产生的,色谱新手也需要注意!流动相一定要过滤!有些色谱操作者可能会想,我不是用的分析级的纯水流动相吗?为什么还要过滤呢?答案是:新制备好的流动相,在室内静置几天后,容易滋生细菌。特别是南方,夏季炎热更容易滋生细菌污染了流动相!恒谱生建议:流动相即配即用,如果要用间隔时间比较久的流动相,一定要过滤!否则滋生细菌... 查看更多
  • 恒谱生建议各位色谱操作者在进行液相色谱分析前,关注样品过滤的重要性,这是为什么呢?主要是为防止蛋白质等杂质沉积在色谱柱上,上柱前需对生物样品进行去蛋白的预处理。这样可以延长色谱柱寿命并减少维护成本,从而有助于提高实验室通量。脱蛋白对于分析生物液体(例如血浆,血清,尿液和脑脊髓液)中的抗生素,残留农药含量等也起着非常重要的影响。并且如果不将沉淀的蛋白质从样品中去除,会导致色谱柱性能下降,最终影响色谱分析结果的准确性。生物样品中去除蛋白质的处理方法有3种:利用蛋白质脱水沉淀。采用... 查看更多
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