液相色谱柱堵塞的3种诊断方法与处理步骤

更新时间：2025-08-06 点击次数：310

　　液相色谱柱堵塞是液相色谱分析中常见的问题，其直接表现为柱压异常升高，主要原因是流路不畅。以下是三种诊断液相色谱柱堵塞的方法以及相应的处理步骤：

　　一、诊断方法

　　1.观察柱压变化：

　　-在使用液相色谱仪时，密切注意柱压的变化。如果柱压突然升高，可能是色谱柱发生堵塞。

　　2.分段检查流路：

　　-从液相色谱仪的尾端开始，逆向分段拆开流路，并仔细观察每个部件装上和拆下时的压力变化。如果某个部件装上后的压力明显高于拆下时，该部件或其附近可能存在堵塞。

　　3.替换测试法：

　　-替换同规格的色谱柱，观察替换后的柱压是否恢复正常。如果替换后的柱压正常，说明原色谱柱存在堵塞问题。

　　二、处理步骤

　　针对诊断出的堵塞位置，可以采取以下处理步骤：

　　1.溶剂过滤头堵塞处理：

　　-首先断开真空泵的入口处，使PEEK管（或其他连接管）低于溶剂瓶，观察液体是否能自由滴下。如果液体不滴或缓慢滴下，则可能是溶剂过滤头堵塞。

　　-处理方法是使用30%的硝酸浸泡过滤头半个小时，然后用超纯水冲洗干净。

　　2.过滤白头堵塞处理：

　　-打开冲洗阀（purge阀），使流动相不经过柱子，观察压力是否明显下降。如果压力没有明显下降，则可能是过滤白头堵塞。

　　-处理方法是将过滤白头取出，用10%的异丙醇超声半个小时。如果处理后压力降至正常范围内，则过滤白头恢复正常。

　　3.液相色谱柱堵塞处理：

　　-如果上述两个位置均未发现堵塞，且替换测试法确认色谱柱堵塞，则需要采取以下措施：

　　-取下色谱柱出口端，观察压力是否下降。如果压力不下降，则确认是色谱柱堵塞。

　　-根据堵塞物质的不同，选择合适的冲洗溶剂。如果是缓冲盐堵塞，则用95%的水冲洗至压力正常；如果是一些强保留的物质导致堵塞，则要用比现在流动相更强的流动相冲洗至压力正常。

　　-如果长时间冲洗后压力仍不下降，可考虑将柱子的进出口反过来接在仪器上，用流动相冲洗柱子。但这种方法操作不当容易造成柱效下降，因此应尽量少用。

　　-如果上述方法均无效，可能需要更换柱子入口筛板或整个色谱柱。

　　液相色谱柱堵塞的诊断与处理需要细致的操作和丰富的经验。在操作过程中，务必注意安全，避免使用有害或易燃溶剂，并确保所有连接部件紧密无泄漏。同时，定期维护和检查液相色谱仪也是预防堵塞的重要措施。