核心结论:常规反相色谱柱(硅胶基质)的使用温度范围通常为4℃~60℃,具体需以色谱柱厂商说明书为准。大多数硅胶基质反相色谱柱(如 C18、C8、苯基柱等)的推荐使用温度为25℃~40℃
- 这一范围能平衡分离效率、峰形和柱寿命,是日常分析的好选择;
- 温度升高可加快传质,改善峰形(减少拖尾)、提高分离速度,但需控制在耐受上限内。
- 普通未封端硅胶基质柱:温度上限多为50℃~60℃,超过 60℃会加速硅胶基质水解(尤其流动相 pH 偏离 2~8 范围时),导致键合相脱落、柱效快速下降;
- 特殊改性硅胶柱(如杂化硅胶、高稳定封端柱):耐受温度可提升至70℃~80℃,适合需要高温加速分离的场景。
- 下限通常为4℃(冷藏温度),主要是为了避免流动相在柱内结冰(水相比例高时),导致柱床因体积膨胀受损;
- 低温(如低于 10℃)会降低传质效率,可能导致峰形变宽、分离时间延长,一般不推荐常规使用。
- 聚合物基质反相柱(如聚苯乙烯 - 二乙烯苯基质):耐受温度更广,部分可达到0℃~80℃,且耐酸碱能力强,适合极端 pH 条件下的高温分析;
- 制备型反相柱:因柱径粗、填料量大,温度控制更保守,通常推荐20℃~50℃,避免温度不均导致压力波动。
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