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液相保护柱在高效液相色谱(HPLC)分析中扮演着重要角色,特别是在处理色素、防腐剂等复杂样品时,其预处理效果直接关系到分析结果的准确性和仪器的使用寿命。以下是对液相保护柱在色素、防腐剂高效预处理方面的详细探讨:一、液相保护柱的作用1.延长色谱柱寿命:保护柱能够阻挡样品中的颗粒和杂...
经常做蛋白质纯化分离实验的色谱工作者,对于疏水色谱(Hydrophobicinteractionchromatography,简写HIC)肯定不陌生,血清蛋白、膜结合蛋白、核蛋白、受体、重组蛋白等化合物纯化都需要用HIC色谱法。HIC在是利用样品分子与固定相的疏水力作用的不同,用流动相洗脱时,各组分迁移速度不同而达到分离的目的。疏水相互作用色谱法具有对蛋白质的回收率高,蛋白质不失活,蛋白质变性可能性小等优点。疏水作用色谱固定相的非极性比较弱,流动相多采用高浓度盐缓冲液进行梯度...
气相色谱(gaschromatography简称GC)是分离和鉴定低分子量气体或挥发性液体的理想技术,它在工业、农业、国防、建设、科学研究中都得到了广泛应用。气相色谱可分为气固色谱和气液色谱。高效液相色谱法的原理与气相色谱法的原理相同。但是气相色谱不适用于不挥发物质和对热不稳定物质,而液相色谱却不受样品的挥发性和热稳定性的限制,有些样品因为难以汽化而不能通过柱子,热不稳定的物质受热会发生分解,也不适用于气相色谱法。这使气相色谱法的使用范围受到了限制。清楚了解这两种分离技术之间...
恒谱生建议各位色谱操作者在进行液相色谱分析前,关注样品过滤的重要性,这是为什么呢?主要是为防止蛋白质等杂质沉积在色谱柱上,上柱前需对生物样品进行去蛋白的预处理。这样可以延长色谱柱寿命并减少维护成本,从而有助于提高实验室通量。脱蛋白对于分析生物液体(例如血浆,血清,尿液和脑脊髓液)中的抗生素,残留农药含量等也起着非常重要的影响。并且如果不将沉淀的蛋白质从样品中去除,会导致色谱柱性能下降,最终影响色谱分析结果的准确性。生物样品中去除蛋白质的处理方法有3种:利用蛋白质脱水沉淀。采用...
色谱柱填料技术呈现二大趋势。一个趋势是快速液相,利用亚2?m小粒径硅胶、核壳型硅胶;第二大趋势是越来越丰富的选择性。填料的粒度主要影响填充柱的两个参数,即柱效和背压。粒度越小,填充柱的柱效越高;小于3μm的填料应用,在相同选择性条件下,提高柱效可提高分离度,但不是位一的因素。如果固定相选择是真确,但是分离度不够,那么选择更小粒度的填料是很用有的,3μm填料填充柱的柱数比相同条件下的5μm填料的柱效提高近30%。然而,3μm的色相谱的背压却是5μm的2倍。与此同时,柱效提高意味...
色谱工作者都知道,在液相色谱仪或者高效液相色谱仪工作时,不能有气泡进入系统,否则会出现诸如杂峰、压力波动不稳定和基线噪音等问题。通常对气泡这种问题,要预先进行处理,如果等到气泡进入系统想要处理,可就不那么容易了。对流动相进行提前过滤和脱气处理,这是一个比较好的解决办法。大家可能会想,我选择实验分析的HPLC级溶剂还要过滤嘛?答案是:还是要过滤的!流动相过滤可以选择溶剂过滤器,过滤掉里面的杂质和避免空气进入系统里。恒谱生溶剂过滤头可有效滤除流动相中的固体颗粒杂质,不会产生气泡,...
无论气相色谱还是液相色谱,我们最终用来分析实验结果的都是色谱峰。zui理想的色谱峰长什么样呢?它长得如下图所示,符合高斯分布的两边对称的色谱峰是理想的峰形。而做色谱分析实验就好像买彩piao,不是每次都有理想的实验结果出现的。更多时候,总是会出现一些“奇奇怪怪”的峰型,比如峰拖尾、峰前延、倒峰、宽峰等。为什么会出现这样的情况呢?要针对不同的峰型来具体分析。比如峰拖尾,这是比较常见的峰型,可能有以下几种原因:色谱柱如果受到污染,会导致柱效下降,影响分析效果。如果等到发现柱头污染...