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本文的重点是快速液相色谱和高效液相色谱。没有一种完mei的协议适合每一种分离目的。因此,建议为您的特定应用程序优化方法。通过本文中列出的建议以及一些前期阅读和测试,您将轻松纯化您正在寻找的组件。一、快速液相色谱纯化使用快速色谱法进行纯化的缺点是该方法固有的分辨率较低。快速液相色谱柱使用更大的粒径和柱容量,允许使用更多的起始材料,但以分辨率和纯度为代价。如果化合物不需要更高的纯度,或者如果下一步将进行HPLC,这可能是您的选择。1、确定溶剂系统样品的纯度(即混合物中有多少化合物...
质谱(MS)使研究人员能够研究许多特性,例如样品的分子量、结构、特性、数量和纯度。当与液相色谱技术相结合能成为一种强大的分析工具,能够从复杂的生物混合物(如牛奶、血清和全脂)中提取有关一系列化合物的有意义的数据,包括药物代谢物、肽和蛋白质-细胞裂解物。一、液相色谱与质谱在将样品引入MS仪器之前,通常通过过滤掉颗粒物、浓缩分析物、脱盐和通常分离出可能导致背景离子或抑制电离的化合物来制备样品。大多数情况下,许多或所有这些步骤都是由HPLC、UPLC系统完成的。样品制备需要对样品进...
分析保护柱是液相色谱分析中重要的色谱耗材,使用保护柱可大大降低分析柱受污染的程度,延长分析柱使用寿命。保护柱位于进样器与分析柱之间,作用主要两方面:1.截留不溶性颗粒2.吸附样品基质中的杂质以下几种情况建议使用保护柱:1.中药、天然产物及合成中间体等基质较复杂的样品分析——因溶解性差异导致样品析出而污染分析柱的情况比较严重,梯度洗脱时影响更大。2.生物样品分析——因样品的不可逆吸附导致的污染,保护柱可先于分析柱承受这种污染,从而延长分析柱寿命。保护柱很重要,但选择合适的保护柱...
UHPLC是一种专门的色谱方法,与HPLC相比,它运行速度更快、分辨率更好并且使用的溶剂更少。UHPLC通过使用填充较小颗粒(通常直径小于2µm)的较小色谱柱来实现这一点。生物化学、细胞和分子生物学、临床医学和许多其他领域的研究人员依靠UHPLC从混合物中分离不同类型的分子——无论这些分子是蛋白质、肽、代谢物、药物化合物还是其他化学物质。尽管UHPLC的性能明显更好,但它并不总是*。在您考虑改用UHPLC时,恒谱生将帮助您区分重要和不重要的内容。一、为什么选择UH...
制备柱具有各种尺寸,可以实现高分辨率分析和快速的分析。在制备色谱中,达到高纯度、高回收率和高通量的分离十分重要。制备柱主要应用在植物化学、药物合成、生物化学等领域的产品的提取及纯化工作中。不同的工作领域中组分的制备和纯化量的差异较大。在生物技术领域中,酶的分离是μg级;在天然产物化学和合成化学领域中,为应对未知成分定性鉴别、结构测定、生物活性测试等要求,需要纯化若干mg级的高纯物;在药品和医药学测试中,需要g级的标准品和对照品;在工业级提纯中,目标产物工业化生产往往需要kg级...
一、分离模式选择色谱柱的首要任务是选择分离模式。分离分子的方法有很多,其中应用*泛的包括反相、正相、亲水相互作用、离子交换和尺寸排阻HPLC。还有一些不太常见但更专业的分离模式,例如使用手性固定相或流动相的特定手性色谱。反相色谱柱通常用于非极性或弱极性有机化合物,它包含非极性固定相(如C18),通常与极性流动相配对。恒谱生C18AQ反相色谱柱在水下拥有*产品的寿命,适于极性较大的物质在高水相条件下的分析。但是该方法不适合应用于蛋白质,流动相通常含有低pH值的乙腈或甲醇,可能会...